puma thunder desert

Argomenti generali, suggerimenti sul forum, richiesta consigli tecnici sulla fotografia naturalistica
Murray Margery
Messaggi: 3
Iscritto il: mer 9 set 2020, 6:43

puma thunder desert

Messaggioda Murray Margery » mer 9 set 2020, 7:02

ÿþDaarentegen ondergingen de puma classic suede isogene U87MG-vectorcellen met lage EGFR-expressie enorme apoptose (49,8%), vergelijkbaar met het niveau dat werd waargenomen met PUMA-downregulatie (45,5%). De resultaten in Fig. 3 geven gezamenlijk aan dat GBM-apoptose positief wordt gereguleerd door PUMA en negatief wordt beïnvloed door EGFR / EGFRvIII, wat suggereert dat PUMA- en EGFR / EGFRvIII-routes functioneel maar omgekeerd gekoppeld zijn aan apoptose in GBM-cellen. De resultaten in Fig. 4 geven aan dat EGFR / EGFRvIII en PUMA in GBM-cellen constitutief een complex vormen onder niet-gespannen omstandigheden en dat het complex blijft bestaan, zelfs na behandeling met de apoptose-inductor, staurosporine (ST).

De effectiviteit van celfractionering wordt aangegeven door de afwezigheid van de cytoplasmatische marker, ±-tubuline, in de mitochondriale extracten en de afwezigheid van de mitochondriale marker, Cox IV, in de niet-mitochondriale extracten. PUMA wordt gesekwestreerd in het cytoplasma van GBM- en borstkankercellen die EGFR en EGFRvIII tot expressie brengen, onafhankelijk van apoptotische stress. De omvang van de mitochondriale translokalisatie van PUMA, mtPUMA Index, wordt berekend zoals eerder beschreven in Materialen en methoden. (A) PUMA is voornamelijk gelokaliseerd in het puma fenty slippers cytoplasma van U87MG-EGFRvIII-cellen. U87MG-EGFRvIII-cellen behandeld met vehikelcontrole, staurosporine (ST, 1 ¼M) of anisomycine (AN, 100 ng / ml) werden geoogst en gefractioneerd in mitochondriale en niet-mitochondriale fracties.

Naast GBM-cellen vonden we dat PUMA gelokaliseerd was in het cytoplasma van MDA-MB-468 menselijke borstkankercellen (Fig. 5d) waarvan bekend is dat ze significante niveaus van endogene EGFR tot expressie brengen [34]. puma slippers fenty Gezamenlijk laten deze resultaten zien dat PUMA wordt gesekwestreerd in het cytoplasma van GBM- en borstkankercellen die EGFR en EGFRvIII tot expressie brengen, constitutief en onder apoptotische stress. Om inzicht te krijgen in de factoren die de interactie van EGFR met PUMA moduleren, hebben we de vereiste van EGFR-activering voor de EGFR-PUMA-interactie onderzocht. Fig. 6a (linker paneel) laat zien dat het vermogen van EGFR om aan PUMA te binden vergelijkbaar was in U87MG-EGFR-cellen met en zonder EGF-stimulatie na serumuithongering.

6b aangeeft dat behandeling met Iressa de interactie tussen EGFR / EGFRvIII en PUMA niet significant beïnvloedde, veronderstellen we dat EGFR / EGFRvIII-gemedieerde antagonisme van PUMA-gemedieerde intrinsieke apoptose bijdraagt aan GBM-resistentie tegen EGFR-gerichte therapie en dat puma thunder desert het herstel van de intrinsieke apoptose door remming Bcl-2 / Bcl-xL kan deze cellen sensibiliseren voor EGFR-gerichte therapie. Daarom hebben we U87MG-EGFR- en U87MG-EGFRvIII-cellen behandeld met een Bcl-2 / BclxL-remmer, 2-MA A3, waarvan is aangetoond dat deze apoptose induceert [42]. Tumorcellen werden behandeld met Iressa alleen (0-100 ¼M), 2-MA A3 alleen (0-100 ¼M) en in combinatie met een molaire verhouding van 1: 2 (Iressa: 2-MA A3). Achtenveertig uur later werden celoverlevingspercentages bepaald en de combinatie-index (BI) berekend met behulp van Median-effectanalyse, zoals we eerder beschreven [9; 34].

Synergie van de behandeling wordt aangegeven door BI-waarden van minder dan 1,0; additief effect, CI = 1,0; antagonistisch effect, CI> 1,0. Zoals getoond in Fig. 6d, resulteerde de combinatie van de EGFR-remmer (Iressa) met de Bcl-2 / Bcl-xL-remmer (2-MA A3) in synergistische celdoding in zowel U87MG-EGFR- als U87MG-EGFRvIII-cellijnen. Deze resultaten geven aan dat gelijktijdige remming van de kinase-onafhankelijke functie van EGFR / EGFRvIII met behulp van een Bcl-2 / Bcl-xL-remmer en de kinase-afhankelijke activiteit door EGFR-kinaseremmers kan leiden tot synergetische therapeutische effecten in GBM-cellen. Overexpressie van EGFR en EGFRvIII is een belangrijk kenmerk van GBM. Hoewel beide receptoren in verband zijn gebracht met GBM-resistentie tegen chemotherapie, zijn de mechanismen die aan deze associatie ten grondslag liggen, nog steeds onduidelijk.

De resultaten in deze studie die aantonen dat GBM's, waarvan bekend is dat ze zeer resistent zijn tegen therapie, hoge niveaus van het pro-apoptotische eiwit, PUMA, tot expressie brengen, zijn paradoxaal. Om inzicht te krijgen in deze paradox, onderzochten we EGFR en puma dames EGFRvIII, vaak tot overexpressie gebracht in GBM vergelijkbaar met PUMA, en ontdekten we dat beide routes omgekeerd evenredig zijn met de apoptotische respons van GBM-cellen. Deze resultaten laten de speculatie toe dat een subset van GBM's (34%) in staat is om de EGFR / EGFRvIII-expressie op te waarderen om PUMA negatief te reguleren en daardoor te ontsnappen aan door therapie geïnduceerde apoptose. Onze resultaten geven echter ook aan dat PUMA negatief kan worden gereguleerd door EGFR / EGFRvIII-onafhankelijke mechanismen, gezien het feit (Fig. 2a) dat een deel van PUMA tot Immagine expressie brengende GBM's EGFR / EGFRvIII niet tot expressie brengen.

Torna a “Varie”

Chi c’è in linea

Visitano il forum: Nessuno e 4 ospiti